DNA fingerprinting é basicamente a identificação de sequências específicas no DNA humano que são altamente variáveis e, portanto, são característicos de cada pessoa. Apesar dessa variabilidade que permite a individualização há semelhanças à medida que o grau de parentesco é mais próximo, o que permite a identificação de filhos, pais, irmãos etc.
O que se faz, na prática, é pegar o DNA, quebrá-lo com enzimas específicas, desnaturá-lo e juntá-lo a sondas específicas para as regiões variáveis (radioativas ou fotoluminescentes). Depois, esses pedaços hibridizados (com sondas ligadas às regiões do DNA que identificam) são separados por eletroforese e o resultado é obtido por exposição da eletroforese em chapa fotográfica. Quando se compara o padrão de distribuição das bandas com o de outras pessoas de referência, pode-se verificar desde paternidade até a identificação de pessoas.
A Eletroforese, ferramenta amplamente utilizada no meio científico, é uma técnica baseada na separação de partículas num determinado gel de acordo com sua massa e carga. A eletroforese pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. O princípio da eletroforese utilizado para separação de DNA baseia-se na carga negativa global de uma porção de DNA. Portanto, iões livres, moléculas de DNA ou fragmentos de DNA numa solução podem ser separados aplicando-se uma carga eléctrica. No final do processo as cadeias de DNA estarão próximas ao cátodo (positivo), que atrai, devido à polaridade, moléculas de carga negativa. O gel de poliacrilamida forma uma malha constituida por uma rede de polímeros que permite a migração de moléculas. Sendo assim, moléculas de menor peso molecular terão mais facilidade em atravessar a malha do gel, posicionando-se assim mais próximas do cátodo; enquanto que as moleculas com maior peso apresentam maior dificuldade e posicionam-se mais próximas do ânodo. A distância que o fragmento percorreu a partir do ponto de aplicação é comparada com a distância que outros fragmentos de tamanhos conhecidos percorreram no mesmo gel.
Obtendo-se assim, algo deste género:
Instrumento utilizado numa electroforese
http://www.icb.ufmg.br/mor/pad-morf/eletroforese.htm
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domingo, 29 de janeiro de 2012
DNA Fingerprint
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